BTN180301 通用型瓊脂糖膠配膠液(20×)

產品簡介
通用型瓊脂糖膠配膠液(20×)的品牌是百奧萊博,是優質的核酸電泳和回收產品,本制品僅用于生物化學研究方面,我公司專注于核酸電泳和回收產品的研發、生產和供應,為您提供的通用型瓊脂糖膠配膠液(20×)質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括通用型瓊脂糖膠配膠液(20×)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:通用型瓊脂糖膠配膠液(20×)
英文名稱:Prestained Gel Buffer,20×,Universal
產品貨號:BTN180301
產品規格:250mL
本產品是本公司在百無憂電泳液基礎上開發的通用型預染瓊脂糖配膠液,含抗水解的核酸染料,用于配制瓊脂糖凝膠,也可用于電泳(但不經濟)。
產品特點:
1. 預染,含低毒穩定的核酸染料,用戶不需要再購買EB、SYBR green I、GelGreen等染料。
2. 穩定,染料不怕光、不怕水、不怕熱,故可以常溫放置兩年,使用效果不衰減。
3. 高,5mL的本產品可以配制100mL 瓊脂糖膠,可倒3-4 塊mini 膠。
4. 所配制的瓊脂糖凝膠跟百無憂電泳液(貨號:BTN151103)和TBE 電泳液兼容。
5. 本產品配制的瓊脂糖凝膠適用于各種DNA 長度的電泳。
6. 用本產品配制的凝膠電泳得到的DNA片段不影響后續的DNA 膠回收和DNA 連接等反應。
產品組成:
組分 | 編號 | 規格 |
配膠液(通用型),20× | BTN180301 | 250mL |
保存條件:常溫保存和運輸,有效期兩年。若低溫放置則有結晶析出(主要是染料在高鹽低溫條件下容易析出),請搖勻后用于稀釋,稀釋20 倍后染料晶體會自然溶解。
自備試劑:去離子水、瓊脂糖
使用方法:
將本產品用去離子水稀釋20 倍(5mL 本產品加95mL 去離子水),混勻后直接用于配制瓊脂糖膠,瓊脂糖膠的濃度根據要分離的DNA片段大小決定。膠凝固后直接用于電泳,電泳液可以使用1×百無憂電泳液,也可以使用1×TBE 電泳液,按常規的電壓電泳即可。
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百無憂電泳液100×(貨號:BTN151103)
TBE 電泳液10×(貨號:BTN90313)
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名稱:一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝
貨號:BTN90317
規格:30次
本品是專門用于DNA 尿素-PAGE電泳的一站式試劑盒。
產品特點:
1.一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。用戶不需要單獨準備各種成分。
2.可用于DNA 測序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保護實驗等。
3. 安全,免去了實驗人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
4.電泳后可直接用于銀染、EB染色等實驗。
產品組成:
成分 | 規格 | 保存 |
電泳級尿素 | 210g | 常溫 |
電泳級丙烯酰胺 | 77.34g | 常溫 |
電泳級甲叉雙丙烯酰胺 | 2.67g | 常溫 |
10×TBE電泳液 | 250ml | 常溫 |
電泳級TEMED | 1.5ml | 4℃,避光 |
電泳級過硫酸銨 | 1g | 常溫 |
2×尿素-PAGE上樣液 | 1ml | -20℃ |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸,保存條件見上表,有效期一年。
使用方法:
一、PAGE濃度和交聯度的選擇指南
尿素-PAGE一般推薦用29:1(丙烯酰胺:甲叉雙丙烯酰胺)的交聯度,
在此條件下,DNA片段和zuì適PAGE濃度對應關系如下:
單鏈DNA長度 | zuì佳PAGE濃度 |
二甲苯青FF遷移率 對應的長度 |
溴酚藍的遷移率 對應的長度 |
50-400nt | 8% | 160nt | 45nt |
200-1000nt | 5% | 260nt | 65nt |
750-2000nt | 3.5% | 460nt | 100nt |
二、制備尿素-PAGE膠
1. 配制尿素-PAGE膠(這是配制100mL膠的用量,配制更大體積的膠則需以此用量為基礎按比例增加)
A:新鮮配制10%的APS(過硫酸銨):按每0.1 克過硫酸銨干粉加1mL超純水的比例將水加到裝有硫酸銨干粉的1.5mL EP 管中,搖晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B:新鮮交聯度為29:1的40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(AB溶液,下同):在裝有77.34 g電泳級丙烯酰胺干粉的瓶中加入約120mL自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充分搖晃混勻后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
C:配尿素-PAGE膠:在一個250mL的三角瓶中,先按下表的用量加入去離子水、40%AB溶液和10×TBE緩沖液。丙烯酰胺單體溶液具有神經毒性,一定要戴手套操作。
PAGE膠濃度 | 各成分用量(尿素為克,其余單位是mL) | 補水到(mL) | ||
尿素 | 40%AB溶液 | 10×TBE緩沖液 | ||
5% | 42 | 12.5 | 5.0 | 100 |
6% | 42 | 15.0 | 5.0 | 100 |
7% | 42 | 17.5 | 5.0 | 100 |
8% | 42 | 20.0 | 5.0 | 100 |
9% | 42 | 22.5 | 5.0 | 100 |
10% | 42 | 25.0 | 5.0 | 100 |
11% | 42 | 27.5 | 5.0 | 100 |
12% | 42 | 30.0 | 5.0 | 100 |
D:攪拌溶解,然后用濾紙過濾。zuì好能抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應),無條件也可以不脫氧。
E:加入500μL 10%APS和100μL TEMED,迅速搖勻后倒膠。
F:在膠的液面距離達到頂部時停止灌膠,插入梳子。
G:室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應)。
H: 拔出梳子,用0.5×TEB液沖洗加樣孔。
三、樣品準備
2. 對一般樣品、測序樣品、微衛星DNA、AFLP樣品、DDRT樣品、RPA樣品:將樣品跟上樣液1:1 混合,95℃ 3分鐘變性,然后放冰上待用。
3. 對TGGE樣品:可以直接上樣。
四:電泳
4. 將凝膠板固定在電泳裝置上,往上槽和下槽中加入足夠0.5×TEB電泳液。
5.預電泳5-30分鐘將冰上放置的樣品上樣。
6.連接電源線,打開電源開關。根據膠的大小選擇功率(固定功率可以固定產熱,這樣不容易發生過熱而使膠板破裂的現象。如果固定電流或電壓,產熱都將隨電泳時間而變化,不好控制)。對小膠一般用5-6W 固定功率,大膠用15-25W 固定功率。
7. 終止電泳,取出凝膠進行后續的處理(如銀染)。注意:如果銀染,必須延長固定時間以便讓洗出尿素,否則殘留尿素會干擾后面的銀染。
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