WH0077 2×Taq Platinum P

2×Taq Platinum P由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研目的,我公司的2×Taq Platinum P品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
特別提示:包括2×Taq Platinum PCR預(yù)混反應(yīng)液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:2×Taq Platinum PCR預(yù)混反應(yīng)液
英文名稱:2×Taq Platinum PCR MasterMix
產(chǎn)品貨號(hào):WH0077
產(chǎn)品規(guī)格:1ml(不含染料)|5×1ml(不含染料)|1ml(含藍(lán)色染料)|5×1ml(含藍(lán)色染料)
本制品包含Taq Platinum DNA聚合酶(貨號(hào):WH0072)、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)的增強(qiáng)劑和優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。可zuì大限度的減少認(rèn)為誤差,可用于高特異性、高保真PCR反應(yīng)及復(fù)雜模板如GC含量高(>60%),有二級(jí)結(jié)構(gòu)等的擴(kuò)增和大規(guī)模基因檢測。
本制品使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×Taq Plantinum PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入ddH2O補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液的濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)品有加染料(為藍(lán)色)和不加染料(為無色)兩種;加染料的產(chǎn)品反應(yīng)完成后,產(chǎn)物可直接電泳。
適用范圍:
·基因檢測:本產(chǎn)品不同批次之間誤差很小,特別適合大規(guī)模基因檢測,半定量PCR實(shí)驗(yàn)和微量DNA的檢測。
·用于從復(fù)雜模板中如基因組等擴(kuò)增高保真產(chǎn)物,如表達(dá)基因的克隆、基因的定點(diǎn)突變和細(xì)胞內(nèi)基因點(diǎn)突變的分析(SNP)等。PCR產(chǎn)物如需克隆,純化后可直接進(jìn)行T/A載體克隆,如需提高克隆效率,建議加A后再進(jìn)行T/A載體克隆。
產(chǎn)品組成:
組分 | WH0077-1 | WH0077-2 | WH0077-3 | WH0077-4 |
2×Taq Plantinum PCR MasterMix | 1ml | 5×1ml | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5 ml | 1ml | 5 ml |
Loading dye in MasterMix | Yes | Yes | No | No |
2×Taq Plantinum PCR MasterMix:
0.1U Taq Platinum Polymerase(貨號(hào):WH0072)/μl,500μM dNTP each,50mM Tris-HCl (pH8.7),20 mM KCl,4 mM MgCl2,其它穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑
儲(chǔ)存條件:-20℃可長期保存,多次凍融不會(huì)影活性。如需經(jīng)常使用,可存放于4℃
質(zhì)量控制:
經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因;室溫(15-25℃)存放一周,無明顯活性改變。
使用舉例:
注意:以下舉例僅供參考,實(shí)際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)實(shí)際情況,設(shè)定zuì佳反應(yīng)條件。
1.用2×Taq Plantinum PCR MasterMix產(chǎn)品,以人基因組DNA為模板,擴(kuò)增1 kb的片段,反應(yīng)體系為25μl(如反應(yīng)體系不同,可按此比例增加或減少用量)。
加入物 | 加入量 |
Template | <1μg |
Primer 1(10 μM) | 1 μl |
Primer 2(10 μM) | 1 μl |
2×Taq Plantinum PCR MasterMix | 12.5 μl |
ddH2O | 補(bǔ)至25μl |
2.PCR反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置:

3.結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取5 μl反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
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貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
BTN70909 | PCR級(jí)綠如藍(lán)DNA染料 | 0.1mL |
BTN101219 | 即用型熒光定量RT-PCR試劑盒 | 50次 |
YT374 | DNA聚合酶(高保真)(率)(雙平端克隆) | 200U|1000U |
WE0152 | 快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系(熒光探針)(低含量ROX校正染料) | 5ml |
SY0032 | 2×Long PCR Master Mix(不含染料) | 1ml |
SY0042 | 脫氧胞苷三磷酸溶液(100 mM)(dCTP) | 400μL |
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名稱:PCR級(jí)綠如藍(lán)DNA染料
貨號(hào):BTN70909
規(guī)格:0.1mL
第二代的非飽和型熒光染料(如SYBR Green I)在高濃度下會(huì)抑制熒光PCR,所以反應(yīng)重復(fù)性很不穩(wěn)定,并且不能用于要求嚴(yán)格的Tm分析。本產(chǎn)品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一樣,是第三代飽和型熒光染料,在飽和濃度下也不抑制熒光PCR反應(yīng)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 飽和濃度不抑制PCR反應(yīng),因此得到的熒光信號(hào)更強(qiáng)。
2. 抗水解、抗熱解和抗光解的能力強(qiáng)于目前zuì常用的SYBR Green I。
3. 飽和濃度下染料分子沒有機(jī)會(huì)在DNA分子間發(fā)生移位,因此熒光強(qiáng)度跟DNA變性程度呈線性關(guān)系,可以用于精細(xì)的Tm 測定實(shí)驗(yàn),如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 儀器(包括iCycler、LightCycler、ABI 測序儀)兼容。激發(fā)和發(fā)射光譜跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光學(xué)設(shè)置參數(shù)。
5. 不能滲透進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),毒性和致突變性遠(yuǎn)低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲線分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛細(xì)管電泳等研究。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先將本產(chǎn)品放置在室溫融化,然后震蕩10秒鐘,短暫離心后待用。下面以50μL的標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系為例說明其使用:
1.在一干凈的PCR 管中,加入下列成分:
試劑 | 加入量 |
10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
MgCl2 50mM | 2.5μl |
dNTP 10mM | 1μl |
本產(chǎn)品(PCR級(jí)綠如藍(lán)染料) | 2.5μl |
Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
DNA模板 | 適量 |
PCR引物 | 5-50 pmol each |
補(bǔ)水到 | 50μl |
2. 放入熒光PCR 儀中進(jìn)行qPCR,并在退火或延長反應(yīng)時(shí)記錄熒光信號(hào)。使用的光學(xué)參數(shù)可以跟FAM或SYBR Green I 完全一樣。
注意事項(xiàng):
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系統(tǒng),需要在Well Inspector選項(xiàng)下的非特異參照中選擇“無”;使用LightCycler時(shí),zuì好在PCR 體系中再加入終濃度為0.5mg/mL的BSA以降低儀器對染料和模板的非特異吸附。
2. 如果使用化學(xué)修飾過的Taq DNA聚合酶,可能需要減低KCl的濃度并提高Tris的濃度。
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