QN4075 丁基-瓊脂糖凝膠4FF

產品簡介
丁基-瓊脂糖凝膠4FF由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研目的,我公司的丁基-瓊脂糖凝膠4FF品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括丁基-瓊脂糖凝膠4FF在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:丁基-瓊脂糖凝膠4FF
英文名稱:Butyl-Sepharose 4FF
產品貨號:QN4075
產品規格:25ml
丁基-瓊脂糖凝膠4FF是將丁基鍵合在瓊脂糖凝膠4FF上形成的一種可利用疏水相互作用來實現目標產品純化分離的疏水類介質。用于生物大分子和乙肝疫苗的純化分離。本品為白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
理化指標:
項目 | 指標 |
配基 | 丁基 |
基質 | 4%交聯瓊脂糖凝膠 |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 45~165μm |
配基密度 | 40 μmol/ml介質 |
zuì高流速(25℃) | 100KPa下200cm/h* |
耐壓 | 0.2MPa |
工作溫度 | 4~40℃ |
pH適用范圍 | 2~14(短時間,在位清洗);3~13(長時間) |
化學穩定性 | 以下溶液中穩定:pH3~12.5中穩定;0.1% triton水溶液和1% MOPS溶液中穩定;5%甲醛中基本穩定 |
*柱子:內徑16mm、柱長10cm,柱床高5cm,25℃,流動相為0.1mol/L NaCl。
包裝:產品以無菌試劑瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小、應用、生產單位”等內容。所選用的包裝應有利于保證產品質量、方便運輸和貯存。
運輸:運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
貯存:產品應密封貯存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇+0.1M醋酸鈉),通風、干燥、清潔的地方,不能冷凍,保質期5年,用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
使用過程:
1.裝柱
① 讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
② 根據柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
③ 將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
④ 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
⑤ 打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2.平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,如0.02~0.05mol/L的PBS加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。
3.上樣
① 樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。&
② 一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
③ 介質對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質、流動相的離子強度和溫度。鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強,介質對組分吸附牢。
4.洗脫
疏水介質可用減小鹽濃度進行洗脫。加表面活性劑或有機溶劑可加強洗脫。zuì常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液,如0.02~0.05mol/L的PBS。
5.再生
一般用低鹽濃度的緩沖液洗,洗10倍以上柱體積,接著用結合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6.在位清洗
① 對于以離子鍵結合上去的蛋白,可以用2M NaCl去除。
② 對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類,可用1M NaOH去除。
③ 對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7.注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
8.去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下方法步驟去除:
① 2倍柱體積的70%乙醇;
② 2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;
③ 1倍柱體積4M尿素;
④ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
9.消毒用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
特別注意:上樣之前,樣品必須去除色素,否則色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
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鈉型732陽離子交換樹脂的使用方法:
1.樹脂預處理。
732樹脂是強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂,新樹脂在使用前,需進行予處理。將準備裝柱使用的新樹脂,先用70-80℃的熱水(清潔的自來水即可)反復清洗。開始浸洗時,每隔約15分鐘換水一次,浸洗時要不時攪動,換水4-5次后,可隔約30分鐘換水一次,總共換水7-8次,浸洗至浸洗水不帶褐色,泡沫很少時為止。也可用10%氯化鈉溶液浸泡樹脂24小時,然后用清水沖洗至洗水無色為止。
2.酸處理。
酸處理zuì好在交換柱中進行,先用濕法裝柱法將樹脂放入柱內。用1N鹽酸緩慢流過樹脂,用量約為強酸陽樹脂體積的2-3倍,每小時1.5倍床層體積流過。酸進完后,再浸泡1小時左右。然后用水沖洗,至出水PH為5左右為止。
3.堿處理。
用1N NaOH流過樹脂,用量及流速與1相同。堿進完后,同樣再浸泡1小時左右。然后用水沖洗,至出水PH為9左右為止。
4.轉型。
若需用H型,則用1N鹽酸或硫酸,將樹脂轉成H型,用量為樹脂體積的3-5倍,流速與1相同。酸流完后,用去離子水沖洗至出水PH值為6以上時,即可投入使用。
若用Na型,則不必轉型,于堿處理完成后,即可投入使用。但沖洗樹脂用水需用去離子水。
5.再生。
再生前,先將樹脂反洗至出水無色透明。
H型樹脂用1N HCL、Na型樹脂用1N NaoH(也可用8%的NaCL溶液)過柱,用量為柱脂體積的2-3倍,流速為每小時1倍床層體積。
再生液過完后,用去離子水洗柱至出水至中性,即可再次投入使用。
儲存條件:RT
名稱:苯甲脒-瓊脂糖凝膠6B
貨號:QN4063
規格:25ml
儲存條件:4℃
外觀:顆粒
名稱:DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B
貨號:QN4092
規格:100ml
DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B是將二乙胺基乙基鍵合在快流速瓊脂糖凝膠上形成的一種弱陰離子交換介質。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的離子交換制備。本品呈白色,球狀、無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
儲存條件:4-28℃
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