亮抑酶肽溶液的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，本制品用于科研目的，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶(hù)稱(chēng)道，了解更多亮抑酶肽溶液等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢(xún)訂購(gòu)。...

特別提示：包括亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)
產(chǎn)品貨號(hào)：GL1454
產(chǎn)品規(guī)格：1ml

用途：
蛋白酶抑制劑

注意事項(xiàng)：
工作濃度3ug/ml

儲(chǔ)存條件：-20℃，避光，18個(gè)月

根據(jù)您的關(guān)注的亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

貨號(hào)	名稱(chēng)	規(guī)格
YT614	RIPA裂解液(強(qiáng)，無(wú)抑制劑)	100ml
YT623	30% Acr-Bis (29:1)	100ml
SNM401	甲叉-雙丙烯酰胺(粉劑)	100g
SNM411	BCA法微量蛋白檢測(cè)試劑盒	96T
KFS086	4-20%預(yù)制膠(205-6.5 kDa分離范圍;12個(gè)樣/膠)	一盒(10個(gè))
SY0343	30%丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺，29:1	500ml
SY0388	小牛腸堿性磷酸酶	1000U

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名稱(chēng)：Bradford法蛋白定量試劑盒
貨號(hào)：BTN80814
規(guī)格：100mL
Bradford法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度是zuì為常用的蛋白檢測(cè)方法之一，在酸性條件下，考馬斯亮藍(lán)染料能與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，其zuì大吸光值也由465nm轉(zhuǎn)移到595nm，通過(guò)顏色的強(qiáng)弱測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的高低。本產(chǎn)品是基于Bradford法蛋白檢測(cè)原理開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．快速，10-20個(gè)樣品只需要10分鐘即可完成測(cè)定。
2．穩(wěn)定，加樣混勻后2分鐘既可測(cè)定，1小時(shí)內(nèi)吸光度變化不超過(guò)10%。
3．線性范圍在 50～1000μg/mL。
4．zuì小測(cè)量體積為1-20μL，zuì低測(cè)量蛋白量為0.5μg。
5．即開(kāi)即用，不需要單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)每個(gè)成分再配制。
6．有常規(guī)和微量?jī)煞N檢測(cè)模式。
7．不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。
8．但受略高濃度的表面活性劑影響，各種蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合效率可能有差異。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	100ml
BSA標(biāo)準(zhǔn)(2mg/mL)	1ml
濾紙	20張
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，BSA 標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、常規(guī)檢測(cè)流程：
此方法在蛋白濃度30-1000μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)R2 = 0.996的直線線性回歸，可定量蛋白濃度在此范圍內(nèi)的蛋白樣品。
1．制備 1×工作液。溶液A與無(wú)菌水按1：4 比例充分混合即為1×工作液(例：4mL溶液A+ 16mL 無(wú)菌水 = 20mL 1×工作液)。
2．濾紙過(guò)濾。過(guò)濾后的工作液室溫條件下可穩(wěn)定使用1-2 星期。
3．檢測(cè)：蛋白樣品與1×工作液按1：50 比例混合(例：100μl蛋白樣品 + 5mL 1×工作液，適用于3mL的比色杯；40μl蛋白樣品 + 2mL 1×工作液，適用于1mL的比色杯；20μl蛋白樣品 + 1mL 1×工作液，適用于平底透明96孔板)。
4．加樣后，充分混勻。
5．室溫放置5分鐘。
6．檢測(cè)吸光度。波長(zhǎng)設(shè)定 = 595nm。
注意事項(xiàng)：
1．不同型號(hào)、規(guī)格的濾紙，具有不同的孔徑，導(dǎo)致可通過(guò)的分子各不相同。請(qǐng)使用本公司提供的濾紙，否則會(huì)導(dǎo)致不同的測(cè)定結(jié)果。
2．檢測(cè)樣品之前，應(yīng)先制備蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線。一般可使用BSA。
a)常規(guī)檢測(cè)：建議使用下述濃度的BSA。
 0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量檢測(cè)：建議使用下述濃度的BSA。
 0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3．檢測(cè)細(xì)胞提取物或純化蛋白樣品，應(yīng)使用相應(yīng)的緩沖液制備蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4．用 96孔板測(cè)定時(shí)，應(yīng)確保沒(méi)有氣泡，否則會(huì)增加吸光度的讀數(shù)。
5．此檢測(cè)試劑不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的表面活性劑影響。若SDS高于0.1%，TritonX-100高于0.1%，Tween20，60，80高于0.06%，可取少量樣品加水稀釋到適當(dāng)濃度，再行測(cè)定。

二、微量檢測(cè)流程：
此方法在蛋白濃度1～20μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)R2=0.992的直線線性回歸，可定量蛋白濃度在此范圍內(nèi)的蛋白樣品。
1．蛋白樣品與溶液A按4:1比例混合，例：

蛋白樣品	溶液A	適用性
400μL	100μL	平底透明96孔板
2mL	0.5mL	1mL的比色杯
4mL	1mL	3mL的比色杯

2．加樣后，充分混勻。
3．室溫放置5分鐘。
4．檢測(cè)吸光度。波長(zhǎng)設(shè)定= 595nm。
注意事項(xiàng)：
1．Bradford蛋白濃度測(cè)定的顯色反應(yīng)受許多去污劑的影響。應(yīng)避免使用SDS，Triton X-100，Tween等溶解蛋白樣品。對(duì)于難溶解的蛋白樣品，可用1MNaOH 溶解和稀釋。
2．Bradford蛋白濃度測(cè)定的顯色反應(yīng)依賴(lài)于蛋白中精氨酸殘基的數(shù)目，因此不同蛋白間測(cè)定的差異可能較大。
3．標(biāo)準(zhǔn)品曲線配制時(shí)，如果吸量不準(zhǔn)確或者加樣槍不會(huì)造成標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)減小，可根據(jù)需要使用倍比梯度稀釋的方法來(lái)配制，或者使用度高的加樣槍。
4．由于Bradford法在蛋白濃度增高到一定時(shí)候，顏色反應(yīng)并不成比例增加，因此得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線只是在一定范圍內(nèi)可以近似看成直線，每次應(yīng)按照實(shí)際測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出相對(duì)的蛋白濃度。
5．不像其它一些蛋白濃度測(cè)定方法(包括Lowry法)，Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二流蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.125%，Triton X-100低于0.125%，Tween 20低于0.06%，可以考慮用超純水稀釋?zhuān)肝?除鹽，ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來(lái)消除干擾物質(zhì)的影響。

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