BTN60706 一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑

北京百奧萊博供應(yīng)的一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑用于科學(xué)研究,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑等核酸電泳和回收產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購。...
特別提示:包括一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑
英文名稱:One-tube DNA agarose gel recovery reagent
產(chǎn)品貨號(hào):BTN60706
產(chǎn)品規(guī)格:30次
本產(chǎn)品可以直接從溶化的瓊脂糖凝膠中沉淀回收單雙鏈DNA的產(chǎn)品,也堪稱zuì快速的膠回收試劑,操作時(shí)間只有玻璃奶式和柱式膠回收方法的1/3左右。本產(chǎn)品也可以用于單雙鏈RNA膠回收。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.超快,整個(gè)過程不到15分鐘(對(duì)一個(gè)樣品而言),由溶膠(3分鐘),放置(2分鐘),沉淀(5分鐘)和兩次洗滌(各1-2分鐘)幾步組成。
2. 純度高,回收產(chǎn)物可以直接用于連接、酶切、PCR、測序等各種反應(yīng),不影響后續(xù)酶反應(yīng)。
3. 回收率高,一般大于50%。
4.適用范圍廣,可用于回收普通瓊脂糖凝膠能夠分離的DNA片段(一般在100bp-50 Kb 之間),而柱式同類產(chǎn)品幾乎都不能回收50 Kb的片段。
5.一管式操作,不需要任何樣品轉(zhuǎn)移步驟,使大片段DNA 保持完整,同時(shí)減少了污染的可能。
6. 既可用于回收單雙鏈DNA,又可用于回收單雙鏈RNA。
7.擴(kuò)容性好,可以在一個(gè)離心管中(包括15mL或50mL離心管)進(jìn)行大規(guī)模回收,沒有zuì大吸附量的限制;而柱式膠回收試劑都受zuì大吸附量的限制。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 9ml |
溶液B | 3ml |
溶液C | 30ml |
說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。
溶液A呈淡黃色,溶液B呈紅色,如果顏色發(fā)生變化,則表示pH已經(jīng)改變,請(qǐng)棄之不用。溶液C為無色液體,會(huì)在瓶底產(chǎn)生少量晶體狀產(chǎn)生沉淀,用前無需溶化,避開沉淀直接取上清液使用)。
使用方法:
1.從瓊脂凝膠上切下目的DNA片段,放入1.5mL離心管中。盡可能多地去掉不含DNA的膠。如果方便zuì好稱重以便估計(jì)需要的溶膠液(空的1.5mL離心管EP 約0.9 克,一片普通膠片的重量在0.05-0.1 克左右)。
2. 按0.1 克膠加300μL溶液A的比例加入溶液A,65℃保溫3分鐘使膠融化。其間可用搖晃幾次以促進(jìn)凝膠融化。如果放量使用,溶化膠的時(shí)間可能需要延長。
3. 待膠完全溶化后,按0.1 克膠加100μL溶液B的比例加入溶液B,充分混勻。如果回收20 Kb以上的DNA片段,混勻時(shí)需要溫和震蕩;對(duì)20 Kb以下的DNA片段,可以劇烈震蕩。
4.室溫靜置至少2分鐘,此時(shí)管內(nèi)將出現(xiàn)大量紅色顆粒狀沉淀。此步十分關(guān)鍵,不能省略而直接離心。
5. 13000 g室溫離心5分鐘后,小心吸棄上清,管底將有黃豆大小的紅色沉淀。
6. 加入0.8mL溶液C,充分震蕩混勻。注意:溶液C瓶底有晶體狀沉淀,用前無需溶解,但取用溶液C時(shí)需要避開沉淀。
7. 13000 g室溫離心2分鐘,小心吸棄上清,管底將有芝麻大小的白色沉淀。
8. 再用0.2mL溶液C重復(fù)第6-7 步一次,管底還有芝麻大小的白色沉淀。
9.小心吸棄上清后即得純化的DNA沉淀,加入少量TE或水,充分吹打溶解。zuì后還會(huì)有少量白色不溶沉淀,屬于正常現(xiàn)象。
疑難解答:
Q:電泳為何不能檢測到回收的DNA?
A:zuì可能原因是各步加入溶液后沒有充分震蕩混勻,其次是沉淀在各步吸棄上清時(shí)候不小心吸走而丟失,三是溶液A和溶液B的pH發(fā)生改變。
Q:電泳時(shí)為何有殘留熒光物在加樣孔中?
A:可能是瓊脂糖凝膠中的雜質(zhì)吸附的DNA,吸取DNA樣品時(shí)zuì好短暫離心,只取上清液。這些不溶雜質(zhì)一般不影響后續(xù)反應(yīng)。使用高純度的瓊脂糖可以減少雜雜質(zhì)的污染。我們一般使用OXOID的瓊脂糖,得到的DNA可以用于常見的分子生物學(xué)后續(xù)反應(yīng)。
根據(jù)您的關(guān)注的一管式瓊脂糖凝膠DNA回收試劑,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱:三合一RNA上樣液(A型,6X)
貨號(hào):BTN3130A
規(guī)格:1.5mL
本品是集RNA變性RNA、上樣、RNA染色三種功能于一體的即用型溶液。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.能提高RNA上樣速度,免去繁瑣的準(zhǔn)備步驟,減少污染。
2.其含有的RNase抑制劑能抑制RNA樣品中殘留RNase的活性,保證電泳過程中RNA的完整性。
3.所含甘油和染料(僅BTN3130A含EB染料),便于直接上樣和UV觀察RNA電泳條帶,免去染色和脫色過程。
4.本產(chǎn)品與DNA/RNA兩用快速電泳液SuperBuffer-2完全兼容。
產(chǎn)品組成:
成分 | 規(guī)格 |
三合一RNA上樣液 | 1.5ml |
說明書 | 1份 |
本產(chǎn)品為紅色液體,含紅色的EB(溴化乙錠),有致癌性,避免用手直接接觸。
另一紅色電泳示蹤劑的電泳速度相當(dāng)于50nt的RNA。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按1:1-1:3的比例將RNA樣品與RNA上樣液混合(如5μL RNA+15μL RNA上樣液)。
2. 65-85℃水浴保溫10分鐘,。
3. 冰浴5分鐘后即可直接上樣電泳。
注:本產(chǎn)品含EB,所以瓊脂糖凝膠中可以不必再加EB。本產(chǎn)品與甲醛瓊脂糖變性凝膠或用DNA/RNA兩用快速電泳液SuperBuffer-2配制的非變性瓊脂糖變性凝膠兼容。
4.電泳完畢后可直接將凝膠放在紫外燈下觀察結(jié)果,RNA 條帶成紅色。
疑難解答:
Q:為何RNA樣品在甲醛變性膠中的電泳效果比普通非變性膠差?
A:這是因?yàn)樵诜亲冃阅z中,即使內(nèi)部有切口的RNA分子(實(shí)際已經(jīng)是兩條RNA分子)也會(huì)通過形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)而跟完整的分子等速電泳,而在變性膠中,完整RNA分子和內(nèi)部有切口的RNA分子將以不同的速度泳動(dòng),所以變性膠看起來效果不好是反應(yīng)了真實(shí)情況,非變性膠看起來好只是一種假象。要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)(如CDNA文庫構(gòu)建)zuì好還是使用甲醛變性膠判斷RNA的質(zhì)量好壞。
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