高純度質(zhì)粒大量提取試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研試驗(yàn)，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要高純度質(zhì)粒大量提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括高純度質(zhì)粒大量提取試劑盒(柱式提取質(zhì)粒)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：高純度質(zhì)粒大量提取試劑盒(柱式提取質(zhì)粒)
英文名稱：A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
產(chǎn)品貨號：ALH089
產(chǎn)品規(guī)格：10次

本試劑盒適用于大規(guī)模高純度質(zhì)粒制備。采用改進(jìn)SDS-堿裂解法裂解細(xì)胞，離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低pH值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它細(xì)菌成分去除，zuì后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

試劑盒組份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脫緩沖液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套

試劑盒特點(diǎn)：
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復(fù)性好?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀?？焖佟⒎奖?，從100-200ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中，可快速提取0.2-0.5mg純凈的高拷貝質(zhì)粒DNA，提取率達(dá)80 %左右。
3.獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高、超螺旋比例高、純度好，可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)
1. 所有的離心步驟如未加另外說明均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到12000g，帶50ml轉(zhuǎn)頭的臺式離心機(jī)。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
3. 提取質(zhì)粒的量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)?？截悢?shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)?；虼笥?0kb 的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，同時(shí)按比例增加P1、P2、P3的用量，洗脫緩沖液應(yīng)在70℃預(yù)熱?？梢赃m當(dāng)?shù)难娱L吸附和洗脫的時(shí)間，提高提取效率。
4. 得到的質(zhì)粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動(dòng)位置不一造成，與提取物培養(yǎng)時(shí)間長短、提取時(shí)操作劇烈程度等有關(guān)。本公司產(chǎn)品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。
5. 質(zhì)粒DNA確切分子大小，必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質(zhì)粒，泳動(dòng)位置不確定，無法通過電泳知道其確切大小。
6. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫， 但應(yīng)該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗脫，質(zhì)粒應(yīng)該保存－20℃。質(zhì)粒DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

本制品別名：高純質(zhì)粒大量制備試劑盒

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