JN0092 100bp DNA Ladder
- 產品/服務：JN0092 100bp DNA Ladder
- 型 號：JN0092
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1345
產品簡介
我公司致力于為客戶提供高純度、低成本的活性重組蛋白，包括100bp DNA Ladder在內的各類受體、細胞因子、生長因子、轉錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
產品詳細介紹
特別提示：包括100bp DNA Ladder Plus在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：100bp DNA Ladder Plus
產品貨號：JN0092
產品規格：500μl(100次)
本DNA Marker為預混1×Loading Buffer的DNA溶液，可直接電泳。100bp DNA Ladder Plus在100bp DNA Ladder基礎上添加了1200bp，1500bp，2000bp三個條帶。
片段組成：
100bp，200bp，300bp，400bp，500bp（加亮），600bp， 700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp，2000bp，其中500bp條帶濃度加倍，約為30 ng/μl，顯示為亮帶，使電泳結果更容易辨認，亦可用于定量。其它各條帶濃度約為10 ng/μl。
儲存條件：-20℃，有效期2年。
圖1：DNA Marker電泳圖
圖2：DNA Marker條帶示意圖
表1：DNA Marker選擇指南
|
目的條帶分子量范圍 （推薦瓊脂糖%） | 標準分辨率 | 高精分辨率 |
|
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose) | 200bp DNA Ladder | 100bp DNA Ladder |
| 200bp DNA Ladder Plus | 100bp DNA Ladder Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD | DNA Ladder 2000 Plus | |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | DIY DNA Marker(條帶任選) | |
| DNA Ladder 2000 | ||
|
1500bp以上 (0.7% Agrose) | DNA Ladder 3000 | 1kb DNA Ladder I |
| DNA Ladder 5000 | 1kb DNA Ladder II | |
| DNA Ladder 9000 | 1kb DNA Ladder Plus I | |
| DNA Ladder 10000 | 1kb DNA Ladder Plus II | |
| λ/Hind III DNA Marker | DIY DNA Marker(條帶任選) |
表2：DNA Marker系列一覽表
| DNA Marker | 條帶組成(bp) | 瓊脂糖(%) |
| 100bp DNA Ladder | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder Plus | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000 | 1.0% |
| 100bp DNA Ladder ODD | 100、300、500、700、900、1100、1500 | 1.5% |
| 100bp DNA Ladder ODD Plus | 100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000 | 1.0% |
| 200bp DNA Ladder | 200、400、600、800、1000、1200、2000 | 1.5% |
| 200bp DNA Ladder Plus | 200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 | 100、250、500、750、1000、2000 | 1.0% |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000 | 1.0% |
| DNA Ladder 3000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000 | 0.7% |
| DNA Ladder 5000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000 | 0.7% |
| DNA Ladder 9000 | 500、1000、2000、3000、5000、9000 | 0.7% |
| DNA Ladder 10000 | 500、1000、2000、4000、7000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder I | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus I | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder II | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| 1kb DNA Ladder Plus II | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
| λ/Hind III DNA Marker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130 | 0.6% |
| DIY DNA Marker(條帶任選) | 100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24個fregment任選 | 詳情請參考說明書 |
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本品是專門用于DNA 尿素-PAGE電泳的一站式試劑盒。
產品特點：
1.一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。用戶不需要單獨準備各種成分。
2.可用于DNA 測序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保護實驗等。
3. 安全，免去了實驗人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
4.電泳后可直接用于銀染、EB染色等實驗。
產品組成：
| 成分 | 規格 | 保存 |
| 電泳級尿素 | 210g | 常溫 |
| 電泳級丙烯酰胺 | 77.34g | 常溫 |
| 電泳級甲叉雙丙烯酰胺 | 2.67g | 常溫 |
| 10×TBE電泳液 | 250ml | 常溫 |
| 電泳級TEMED | 1.5ml | 4℃，避光 |
| 電泳級過硫酸銨 | 1g | 常溫 |
| 2×尿素-PAGE上樣液 | 1ml | -20℃ |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸，保存條件見上表，有效期一年。
使用方法：
一、PAGE濃度和交聯度的選擇指南
尿素-PAGE一般推薦用29：1(丙烯酰胺：甲叉雙丙烯酰胺)的交聯度，
在此條件下，DNA片段和zuì適PAGE濃度對應關系如下：
| 單鏈DNA長度 | zuì佳PAGE濃度 |
二甲苯青FF遷移率 對應的長度 |
溴酚藍的遷移率 對應的長度 |
| 50-400nt | 8% | 160nt | 45nt |
| 200-1000nt | 5% | 260nt | 65nt |
| 750-2000nt | 3.5% | 460nt | 100nt |
二、制備尿素-PAGE膠
1. 配制尿素-PAGE膠(這是配制100mL膠的用量，配制更大體積的膠則需以此用量為基礎按比例增加)
A：新鮮配制10%的APS(過硫酸銨)：按每0.1 克過硫酸銨干粉加1mL超純水的比例將水加到裝有硫酸銨干粉的1.5mL EP 管中，搖晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B：新鮮交聯度為29:1的40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(AB溶液，下同)：在裝有77.34 g電泳級丙烯酰胺干粉的瓶中加入約120mL自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中)。充分搖晃混勻后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
C：配尿素-PAGE膠：在一個250mL的三角瓶中，先按下表的用量加入去離子水、40%AB溶液和10×TBE緩沖液。丙烯酰胺單體溶液具有神經毒性，一定要戴手套操作。
| PAGE膠濃度 | 各成分用量(尿素為克，其余單位是mL) | 補水到(mL) | ||
| 尿素 | 40%AB溶液 | 10×TBE緩沖液 | ||
| 5% | 42 | 12.5 | 5.0 | 100 |
| 6% | 42 | 15.0 | 5.0 | 100 |
| 7% | 42 | 17.5 | 5.0 | 100 |
| 8% | 42 | 20.0 | 5.0 | 100 |
| 9% | 42 | 22.5 | 5.0 | 100 |
| 10% | 42 | 25.0 | 5.0 | 100 |
| 11% | 42 | 27.5 | 5.0 | 100 |
| 12% | 42 | 30.0 | 5.0 | 100 |
D：攪拌溶解，然后用濾紙過濾。zuì好能抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應)，無條件也可以不脫氧。
E：加入500μL 10%APS和100μL TEMED，迅速搖勻后倒膠。
F:在膠的液面距離達到頂部時停止灌膠，插入梳子。
G:室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應)。
H: 拔出梳子，用0.5×TEB液沖洗加樣孔。
三、樣品準備
2. 對一般樣品、測序樣品、微衛星DNA、AFLP樣品、DDRT樣品、RPA樣品：將樣品跟上樣液1:1 混合，95℃ 3分鐘變性，然后放冰上待用。
3. 對TGGE樣品：可以直接上樣。
四：電泳
4. 將凝膠板固定在電泳裝置上，往上槽和下槽中加入足夠0.5×TEB電泳液。
5.預電泳5-30分鐘將冰上放置的樣品上樣。
6.連接電源線，打開電源開關。根據膠的大小選擇功率(固定功率可以固定產熱，這樣不容易發生過熱而使膠板破裂的現象。如果固定電流或電壓，產熱都將隨電泳時間而變化，不好控制)。對小膠一般用5-6W 固定功率，大膠用15-25W 固定功率。
7. 終止電泳，取出凝膠進行后續的處理(如銀染)。注意：如果銀染，必須延長固定時間以便讓洗出尿素，否則殘留尿素會干擾后面的銀染。
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