技術資料—石蠟包埋組織microRNA快速提取試劑盒

  古朵生物—石蠟包埋組織microRNA快速提取試劑盒(離心柱型)

  一、原理簡介

  改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活 RNA 酶，然后總 RNA 在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟，漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除，zui后低鹽的 RNasefree water 將純凈 RNA(microRNA)從硅基質膜上洗脫。

  二、試劑盒特點

  1. 離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩定的弊端。

  2. 結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好，純度高和離心柱方便快捷的優點，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA 可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。

  3. *的 MRL 裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。

  4. 多次漂洗去蛋白過程，提取 RNA 純度高。

  三、注意事項(實驗前必須首先閱讀這部分!)

  1. 為防止RNA降解，所有離心步驟如未加說明，均在4℃低溫進行。使用轉速可以達到13,000 rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf5415C 或者類似離心機。

  2. 裂解液 MRL 中含有刺激性有害化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。

  3. 預防 RNase 污染，在實際的操作中應遵循以下指南(參見《分子克隆》)

  * 全程佩戴一次性手套。皮膚經常帶有細菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養良好的微生物實驗操作習慣預防微生物污染。

  * 使用滅菌的、一次性的塑料器皿和自動吸管抽提RNA，避免使用公共儀器所導致的RNA酶交叉污染。

  * 使用無 RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在 150°C 的烘箱中烘烤 4 小時，塑料器皿可以在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 分鐘，用水*漂洗干凈后高壓滅菌備用。

  4. 考慮到環保問題，本試劑盒不含有實驗室常用試劑，用戶使用前需要自備。

  5. 常規的瓊脂糖凝膠電泳和變性膠電泳均可以用來分析大 RNA 的質量。好的 RNA 產物在電泳后應該可以看到明顯的二條優勢核糖體 RNA 帶，分別為~5Kb(28S)，~2Kb(18S)，條帶亮度比值約為 2：1。

  6. 檢測 OD260/OD280吸光度比值時，RNA 樣品應該溶于 TE 后檢測，如果用水稀釋后檢測，由于一般水離子強度和 PH 值低，會使 OD280升高，從而使比值降低。

  7. 加入裂解液 MRL 勻漿后，加前，樣品可在 –60℃-70℃ 保存一個月以上。

  microRNA快速提取試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。