古朵闡述：多重免疫熒光串色的因素

  隨著TSA試劑盒(酪胺信號放大技術(shù))的興起，多個marker的標(biāo)記不再是難題，比如CD4 CD8 CD68 CD56 a-SMA 這幾個marker的多重免疫熒光組合，能突破傳統(tǒng)方法的限制，實(shí)現(xiàn)這個組合的同一張切片上的同時標(biāo)記，但是，要想順利得到理想的結(jié)果，還需要解決一些問題，其中大部分人都會面臨一個比較突出的問題：串色。

  出現(xiàn)串色，到底是哪些方面原因?qū)е碌?下面根據(jù)古朵技術(shù)的一些經(jīng)驗(yàn)簡單列舉一下：

  1 染料本身激發(fā)波長發(fā)射波長相隔太近 比如 alexa flour568 和alexa flour 555就很難區(qū)分開 (通過目前的一些成像設(shè)備很難區(qū)分開兩種熒光)

  2 成像設(shè)備的一些局限 比如熒光顯微鏡的濾光片 波長比較近，比如cy3濾光片 和texred或者tritc濾光片 cy5濾光片&CY5.5濾光片 會有串色

  3 當(dāng)染料本身的問題 以及硬件問題都解決了后 可能還會出現(xiàn)串色，這個就屬于染色強(qiáng)度不匹配的問題了，比如綠光 曝光2ms(強(qiáng)信號) 紅光曝光50ms(弱信號) 這個時候很有可能綠光的信號會延伸至紅光

  4  除了以上這些問題 還有可能就是操作失誤導(dǎo)致的串色 比如CD4標(biāo)記后 第二輪修復(fù)時做CD8指標(biāo)時 修復(fù)強(qiáng)度不夠(未能將CD4在上一輪形成的 一抗二抗hrp復(fù)合體完全洗脫掉)這個時候也有可能形成明顯的串色 比如CD8 除了有真實(shí)的CD8表達(dá) 還會有一部分CD4 表達(dá) 形成了假陽性CD4(實(shí)為CD8的影子)

  上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。