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【古朵生物】酶聯免疫吸附實驗中血清的詳細處理
發布時間:2023-10-07瀏覽次數:836返回列表
酶聯免疫吸附實驗中血清的詳細處理
ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體外表,使酶符號的抗原抗體反響在固相外表進行的技能。該技能可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、活絡、簡潔、載體易于標準化等優點。酶聯免疫吸附實驗中血清的詳細處理保存意見:
(1)要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
(2)ELISA試劑盒標本在保存中如呈現細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
(3)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性干擾。
(4)血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
(5)冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。
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