古朵快訊：ELISA試劑盒試驗常見問題簡析

  ELISA試劑盒實驗時的留心事項如下：

  1、正式實驗時，應(yīng)別離以陽性對照與陰性對照操控實驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗成果的性。有時本底較高，闡明有非特異性反應(yīng)，可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

  2、在ELISA中，進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很主要的，其間包括：

  (1)固相載體的選擇：ELISA試劑盒很多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在運(yùn)用前均可進(jìn)行選擇：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng)，查詢其顯色反應(yīng)是不是均一性，據(jù)此判明其吸附功用是不是出色。

  (2)ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體外表時，懇求純度要好，吸附時通常懇求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響，通常多選用4℃18～24小時。ELISA試劑盒蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后，在其它實驗條件相一同，查詢陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。關(guān)于大都蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。

  (3)酶符號抗體作業(yè)濃度的選擇：ELISA試劑盒首先用直接ELISA法進(jìn)行開端效價的滴定(見酶符號抗體部份)。然后再固定其它條件或采用“方陣法”(包被物、待檢樣品的參看品及酶符號抗體別離為不一樣的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里地滴定其作業(yè)濃度。

  (4)ELISA試劑盒酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇懇求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)留心防護(hù)。有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是如今較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)參與強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以停止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物運(yùn)用液有必要新鮮制作，尤其是H2O2在臨用前參與。

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒