RNA純化試劑盒特性與優(yōu)點(diǎn)：
可靠--保證每一次所得產(chǎn)物的純度
安全--無(wú)須接觸有害的有機(jī)物
高質(zhì)--高純的RNA適合于各種應(yīng)用




聚丙烯酰胺凝膠RNA純化試劑盒說(shuō)明書(shū)操作流程：

注：使用之前加入4倍體積的無(wú)水乙醇（11ul原液 + 44ul無(wú)水乙醇。

1、RNA樣品用RNAase水補(bǔ)齊至100ul,然后加入350ul Buffer RLT，充分混勻。

2、向以上稀釋的RNA液中加入250ul無(wú)水乙醇，用移液槍充分混勻,切記勿用離心機(jī)。隨后立即進(jìn)行步驟3。
3、將以上700ul樣品液轉(zhuǎn)移至吸附柱，（吸附柱放置于2ml收集管中），蓋上管蓋。以≥8000g轉(zhuǎn)速離心15s，棄掉收集管中廢液。   可選:   如果需要執(zhí)行在吸附住上進(jìn)行DNase消化，則需按如下步驟進(jìn)行：

a.向吸附柱中加入350ul Buffer RW1，蓋上管蓋，以≥8000g（≥10000rpm）轉(zhuǎn)速離心15s。棄掉收集管中的廢液。

b.向70ul Buffer RDD中加入10ul DNase 1，混合顛倒離心管，短暫離心。

c.對(duì)準(zhǔn)吸附柱薄膜中央加入80ul DNase 1 混合液，室溫放置15min。

d.向吸附柱中加入350ul Buffer RW1，蓋上管蓋，以≥8000g（≥10000rpm）轉(zhuǎn)速離心15s。棄掉收集管中的廢液。

4、向吸附柱中加入500ul Buffer RPE,蓋上管蓋。以≥8000g轉(zhuǎn)速離心15s，清洗濾膜。棄掉收集管中的廢液。

5、重復(fù)操作4。   可選：  將吸附柱放置于新的2ml 收集管中。蓋上管蓋，以zui大轉(zhuǎn)速離心1min。

6、將吸附柱放置于新的1.5ml收集管中，對(duì)準(zhǔn)吸附柱薄膜中央加入30-50ul RNase-Free Water 。蓋上管蓋，≥8000g轉(zhuǎn)速離心1min，洗脫RNA。

7、如果想獲得更高的RNA濃縮液（預(yù)期的RNA產(chǎn)量＞30ug），重復(fù)步驟6向吸附柱中加入新的30-50ul RNase-Free Water ，或者重新利用第6步洗脫的RNA液重新加入吸附柱中洗脫。重復(fù)利用第6步中的1.5ml收集管。



聚丙烯酰胺凝膠RNA純化試劑盒采用硅膠柱純化方式，適合于從各種濃度各種類(lèi)型的聚丙烯酰胺凝膠中回收RNA。純化過(guò)程無(wú)需用到有害的有機(jī)物萃取及乙醇沉淀，大大減少了操作時(shí)間，提高了RNA回收效率。回收產(chǎn)物可用于RT-PCR、Northern雜交等實(shí)驗(yàn)。RNA經(jīng)PAGE凝膠電泳分離后，切下含目標(biāo)RNA片段的凝膠塊，用兩塊無(wú)RNase的玻璃片壓碎凝膠塊(因聚丙烯酰胺胺凝膠不能溶解，這一步要盡量壓碎凝膠)，用含有EDTA的緩沖液浸泡凝膠后，轉(zhuǎn)移至過(guò)濾柱中過(guò)濾去除凝膠碎片，加入的結(jié)合緩沖液后，轉(zhuǎn)移至HiBind®離心柱，離心結(jié)合RNA，經(jīng)簡(jiǎn)單的洗滌后，用DEPC-Water洗脫RNA。



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