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氨基酸手性分析柱分析驗證方面的問題
發(fā)布時間:2019-04-16瀏覽次數(shù):2012返回列表
氨基酸手性分析柱是將手性固定相與色譜填料結合在一起,通過固定相與化合物之間作用力的差別來實現(xiàn)對映異構體的分離,現(xiàn)在手性色譜固定相有了越來越多的種類,因此目前大部分的手性分離的方法是用手性色譜柱進行分離。
氨基酸的手性純度是廣大肽類藥物生產企業(yè)zui為關心的事情,一根的手性分析柱,合適的檢測條件的選擇,適當?shù)牧鲃酉囿w系的選擇都是必不可少的重要手段。
關于氨基酸手性分析柱分析方法的驗證問題
合適的檢測條件指的是波長的選擇問題,一般200-280nm都是可以選擇的范圍,但究竟哪種適合是有諸多講究的. 先,要保證被測主體樣本可視,即有明顯吸收峰。其次,要能放大異構體的可觀測度,由于樣本中除了含有被觀測主體外還存在其它雜質,為了避免其它干擾因素的影響,要盡量選擇主體吸收高的波長,(做一個全波長掃描可以解決)。
適當?shù)牧鲃酉囿w系是指流動相中A,B的選擇還有梯度等因素。通過不斷嘗試先要把兩種不同異構體能分開,其次,要盡量規(guī)避小雜質在體系中與被觀測的異構體重合,造成分析誤差.這種條件的選擇工作量雖然較大,但只要耐心總可以找到一個比較適合的方法。
在解決了檢測條件和流動相問題后,還不能直接用此對樣本進行分析了,因為該方法尚未得到驗證,其可靠性還存在疑問。驗證的目的是要解決zui低檢測量和線性檢測區(qū)間兩個關鍵問題。
氨基酸手性分析柱可用來分析氨基酸。流動相為甲醇:磷酸鹽緩沖液(35/65);檢測器為UV254nm。綠百草科技可提供詳細的操作條件和譜圖。