熒光定量pcr儀由熒光定量系統和計算機組成，用來監測循環過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過開發的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環數的圖表。原始數據收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平，這就是分析熒光數據的水平。常見問題解答如下：

Q：7500定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應管或者96孔板嗎？
A：不可以，7500快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應管或者96孔板。

Q：熒光定量pcr儀有什么特點？
A：（1）系統可以提供高通量，如384孔板和低密度芯片升級，以及自動手臂來裝載反應板設備；
（2）是一個激發光和四色濾光片
（3）系統是用氬離子激光作為激發光源，可以掃描500nm -650nm所有波長的熒光
（4）快速系統是用鹵鎢燈作為激發光源，并利用濾光片檢測激發熒光
（5快速有五個激發光和五個濾光片，所以可以檢測遠紅外。

Q：內參基因與目標基因是否需要在相同的反應板上運行相對定量？
A：是，內參基因必須和目標基因在相同的反應板上。軟件可以根據在相同反應板上的內參基因和目標基因自動進行相對定量計算，并計算估值區間。

Q：BHQ作為探針的淬滅基團，在ABI定量PCR系統如何設定？
A：淬滅基團設為none。

Q：7HT定量PCR系統軟件生成的文件有哪些？
A：針對7300 v1.4及以下版本軟件，7500 v1.4 及以下版本軟件，7900HT軟件生成的文件，包含擴增曲線的為數據文件，以 sds為文件后綴。相對定量分析產生以sdm為后綴文件，設置模板以 sdt為后綴。

Q：用戶是否可以添加自定義染料？
A：可以，可以添加自定義染料，但染料的激發和發射波長必須與儀器的濾光片設置兼容。

Q：如何監控反應體系是否有蒸發？
A：查看Rox信號是否在整個PCR過程中保持一致。在多組分圖譜界面，選擇單孔，如果Rox信號逐漸增高，代表樣品孔中有蒸發。

Q：作用原理是怎么樣的？
A：熒光定量pcr儀常用的檢測模式有TaqMan探針和SYBR Green I 檢測模式。