人卵巢癌細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)過程
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人卵巢癌細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)過程
1.人卵巢癌細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)所需的材料
1.1.CAOY3，使用％15的小牛血清L-15培養(yǎng)達(dá)到飽和濕度。二氧化碳含量為5％，溫度為37攝氏度的溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
1.2.保爾佳。國(guó)外某制藥廠生產(chǎn)。
1.3.卡鉑、甲氨喋吟以及5—FU都為市場(chǎng)銷售的針劑。
1.4.MTT，250毫克每瓶，使用生理鹽水將其配置成5毫克每毫升的溶液，存放在4攝氏度的環(huán)境下，且要避開陽光的照射。
1.5.二甲基亞砜，市場(chǎng)上銷售的分析純?cè)噭?/div>
1.6.酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。
1.7透射電子顯微鏡，采用日歷H-600型號(hào)。
2.人卵巢癌細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法
2.1.藥物的抑制作用的測(cè)試。將處在指數(shù)增殖期的細(xì)胞消化，配成溶度是200000個(gè)每毫升的單細(xì)胞懸液，將96孔板加入進(jìn)去，每個(gè)加入細(xì)胞的懸液是0.1毫升，細(xì)胞的數(shù)量為20000個(gè)每孔。把96孔板放置在37攝氏度溫箱內(nèi)培養(yǎng)一天，當(dāng)細(xì)胞貼壁良好后，將每班設(shè)為對(duì)照組以及觀察組，觀察組每孔加入少量的含藥液的培養(yǎng)基0.1毫升，同樣，對(duì)照組加入相同量的培養(yǎng)基。根據(jù)公式C=（50×D）/5000×1000/50％，即可計(jì)算出要溶度（其中D為臨床常用的溶度，單位是mg/kg每天，C是體外常用的溶度，單位是拼ug/ml），使其藥物的溶度是C、10、C/10、C/100。把加入藥后的96孔板分為兩組后放置在37攝氏度的溫箱內(nèi)，分別培養(yǎng)一天以及3天（一天24小時(shí)）。在培養(yǎng)快要結(jié)束的前4小時(shí)，將96孔板加入0.01毫升的MTT溶液。當(dāng)培養(yǎng)結(jié)束后，要將孔內(nèi)的液體去除，再每孔加入0.2毫升的DMSO，搖晃震蕩30分鐘，使用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀比色，測(cè)量出的波長(zhǎng)是490納米，參考波長(zhǎng)為450納米。根據(jù)公式（1－B/A）×100％（A、B分別是對(duì)照組以及觀察組的光密度值），即可計(jì)算出藥物的抑瘤率。此實(shí)驗(yàn)應(yīng)該重復(fù)4次，采用F檢驗(yàn)或者t檢驗(yàn)進(jìn)行信息處理。
3.人卵巢癌細(xì)胞系增殖抑制作用的研究
據(jù)有關(guān)文件記載，上世紀(jì)八十年代末就對(duì)保爾佳的抗腫瘤作用進(jìn)行過報(bào)道，在此之后，越來越的多的報(bào)道顯示：保爾佳在治療惡性腫瘤中發(fā)揮的作用越來越顯著。不過，對(duì)于治療卵巢癌的相關(guān)報(bào)導(dǎo)卻很少，基礎(chǔ)性研究更是沒有。本文研究顯示：在24小時(shí)作用下，保爾佳對(duì)于人卵巢癌CAOV3細(xì)胞的增殖抑制作用和卡鉑等化療藥物相似，并沒有顯著的差異性可言。在3天時(shí)間的作用下，其保爾佳的抑制瘤腫效果明顯比5-FU更低，而和別的化療藥物沒有顯著的差異。這樣充分說明，保爾佳能夠作為一種抗擊腫瘤的藥物，單獨(dú)的使用于卵巢癌病人身上。該要沒有明顯的副作用，且可以提升機(jī)體的免疫能力。因此，更適用于不能接受普通治療的晚期患者。
