豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1ELISA試劑盒

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豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒方法類型:
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,操作步驟如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。
(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
(3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
(4)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
圖片,參數 僅供參考!【豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒】用戶可向客服索取說明書》》在線索取
寄標本時需注明以下情況:
1、標本編號;2、所測項目;3、是否做復孔;3、聯系方式;4、實驗后標本是否寄回。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
訂貨說明:
1.部分常用指標備有現貨,一般情況下都能下單后第二天發貨,所有產品出貨前均進行嚴格的質控檢查,以確保將合格的產品送到客戶手中
2.部分非常用指標需要提前一周左右預定。
3.買方在簽訂合同時,請仔細核查所訂產品的貨號、品名、規格、數量、金額,以便所訂產品準確無誤。因買方未準確核對而造成的一切后果,賣方不承擔任何責任。合同簽定后,買方不得中途退貨,否則,賠償賣方因此所受的全部經濟損失。
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