人血小板抗體(APA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人血小板抗體(APA)水平。用純化的抗原包被微
孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入血小板抗體(APA),再與HRP標(biāo)記的抗
原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP
酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板
抗體(APA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣
品中人血小板抗體(APA)濃度。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
800ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
PYD 人膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格: 48T/96T
PCP 人膠原C端肽酶 規(guī)格: 48T/96T
DAF 人降解加速因子 規(guī)格: 48T/96T
PCT 人降鈣素原 規(guī)格: 48T/96T
CGRP 人降鈣素基因相關(guān)肽 規(guī)格: 48T/96T
CT 人降鈣素 規(guī)格: 48T/96T
BFP 人堿性胎兒蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ALP 人堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-9 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-6 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-4 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
Cx 人間隙連接蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ALK 人間變性淋巴瘤激酶 規(guī)格: 48T/96T
TAb 人甲狀腺素抗體 規(guī)格: 48T/96T
T4 人甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
TG 人甲狀腺球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TAb 人甲狀腺抗體 規(guī)格: 48T/96T
TBG 人甲狀腺結(jié)合球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TPO 人甲狀腺過氧化物酶 規(guī)格: 48T/96T
THAA 人甲狀腺非肽激素抗體 規(guī)格: 48T/96T
TSI 人甲狀腺刺激免疫球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PTHrP 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PTH 人甲狀旁腺激素 規(guī)格: 48T/96T
AFP 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格: 48T/96T
fMet 人甲酰甲硫氨酸 規(guī)格: 48T/96T