柱式血液DNA提取試劑盒說明書

產(chǎn)品編號：BTN60306

規(guī)格：50T/200T

產(chǎn)品及特點：

本產(chǎn)品是基于離心柱/硅膠膜原理的、專門用于從新鮮或冷凍的動物(包括人和禽類)抗凝全血中提取基因組DNA的試劑。它具有下列特點：

1. DNA純凈，OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質(zhì)和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、雜交等。

2. 產(chǎn)量高，一般為1-10ug/mL全血(對哺乳動物血液)。

3. 操作簡單，整個過程約20分鐘，全室溫操作，適合大規(guī)模樣品處理。

4. 用量廣泛， 每次可以處理少達(dá)20 μL（對禽類動物血液）， 多達(dá)1 mL的血液(對哺乳動物血液)。

5. 安全，本試劑盒對人體，無腐蝕性和刺激性氣味。

規(guī)格及成分：

保存條件：

常溫運(yùn)輸、4℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 在0.02-1 mL新鮮或抗凝血液（冷凍血需先37℃水浴融化）中加入0.5 mL紅細(xì)胞裂解液（A型），吹打混勻。

a) 哺乳動物，血液使用量以300 μL以下為宜，使用量越大產(chǎn)量越高，但產(chǎn)率會降低。如果血液多于300 μL，重復(fù)1-2步兩次可以提高產(chǎn)率。

b) 禽類動物，血液使用量以20 μL以下為宜，可以從第3步做起。

2. 室溫12,000-15,000 rpm離心5分鐘，沉淀呈粉紅色，小心傾去上清。

3. 再短暫離心半分鐘，吸棄殘留的液體。此步有利于后面的細(xì)胞裂解，但一般可以省略。

4. 向有沉淀的離心管內(nèi)加入0.5 mL溶液A（溶液A有少量晶體沉淀，用前需要搖晃均勻），用移液槍吹打使沉淀充分懸浮起來。此步目的是裂解細(xì)胞，釋放DNA，所以吹打越充分越好。

5. 靜置2分鐘待溶液變清亮后，將液體轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中并靜置2-5分鐘，以使DNA與膜充分結(jié)合。

6. 12,000 rpm離心半分鐘，DNA將吸附到膜上，棄收集管中的廢液。

7. 加入0.7 mL的通用洗柱液，12,000 rpm離心半分鐘，棄收集管中的廢液。

8. 加入0.3 mL的通用洗柱液，12,000 rpm離心半分鐘，棄收集管中的廢液。

9. 12,000 rpm離心半分鐘，甩干殘留液體。此步很重要，以去除膜上殘留通用洗柱液，否則會影響后續(xù)反應(yīng)。

10. 將離心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料離心管（自備）中，加入適量50 μL DNA洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。如果將DNA洗脫液2.0在65℃預(yù)熱后再使用，洗脫DNA的效果會更好。

11.12,000 rpm離心半分鐘，離心管底溶液即DNA溶液?？梢粤⒓词褂没蚍疟溟L期保存。