貨號：C6101

規格：5000U

產品組成及保存條件：

編號	規格	儲存條件
C6101	5000U	-20°C，保質期24個月

 

濃度：40000U/ ml

產品簡介：

RNase Inhibitor可與RNase 非共價結合，開成1:1的復合物，可以特異性抑制RNase A、RNase B、RNase C和人胎盤RNase，不抑制T1和RNase H活性，具有廣譜的RNase抑制活性。對RNase1、RNaseT1、S1核酸酶，RNase H或來源于曲霉屬的RNase無抑制作用。兼容性好；不影響M-MLV或AMV Reverse Transciptase、Taq DNA Polymerase、T3、T7或SP6 RNA Polymerase 活性，在較寬的pH范圍內（pH 5-8)均可發揮作用。尿素及巰基類試劑可以解離本品與RNase 形成的復合物，使RNase復活而RNase Inhibitor 不可逆失活，因此反應體系中應避免尿素及巰基類試劑存在。

RNase抑制劑的分子量為50kDa,通過非共價鍵以1:1的比例與RNase結合而抑制其酶活，結果常數大于10¹⁴

產品應用：

1、RT-PCR；

2、cDNA 合成反應，提高多聚核糖體的產量和活性；

3、體外無細胞系統轉錄或翻譯（Cell-free in vitro transcription or translation system)

4、酶催化的RNA標記反應；

5、對RNA的完整性要求高的其他應用。

產品來源：

來自豬的RNase抑制基因在大腸桿菌中表達和多步純化精制而成。

活性定義：

一個活性單位（U）定義為：抑制5ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量。

活性測定是通過抑制RNaseA對胞嘧啶 2′,3′ -環單磷酸鹽的水解來測定的。

酶儲存液：

20mM HEPES-KOH，50mM KCI,8mM DTT,50%Glycerol, PH7.6@25℃

保存條件：

-20°C，有效期24個月。

使用說明：

使用RNase Inhibitor避免RNase污染方法：加入抑制劑，使反應終濃度達到1U/ul。再加入組分過程中，RNase抑制劑應在其他可能是RNase污染源的組分（如酶、微量質粒）之前加入。

注意事項：

1、RNase Inhibitor 是一種50kDa的蛋白質，在變性條件下會失活。

2、RNase Inhibitor 應在低于50℃的溫度下使用。

3、本品抑制RNase活性的pH值范圍較廣，在pH7~8時表現zui大活性。

4、避免起泡劇烈攪拌、渦旋等操作，以防止本品失活。

 

附：RNA酶抑制劑各個實驗反應量推薦：

1.RT PCR：推薦反應體系按照1U／ul；

2.cDNA合成：推薦反應體系按照0.5~1U／ul；

3.體外無細胞系統轉錄：推薦反應體系按照15~20U／ul；

4.SP6或T7RNA聚合酶的體外轉錄：推薦反應體系按照1U／ul；

5.多核糖體分離：推薦反應體系按照1U／ul；

6.體外翻譯：推薦反應體系按照1U／ul；

7.酶催化的RNA標記反應：推薦反應體系按照1U／ul；

 上述所述實驗給出的是推薦反應用量，具體的RNA酶抑制劑在各個實驗反應中的zui佳用量需要具體實驗具體分析，因為RNA酶抑制劑的具體定量與不同實驗反應中的RNase含量和反應Buffer都有關聯，所以，實驗反應中的zui佳NRA酶抑制劑的用量建議還是要做一下預實驗來確定。