產品簡介
從細胞/組織樣本中純化不含苯酚的總RNA,配有基因組DNA去除柱獨特的gDNA Eliminator柱,無需DNase處理 數分鐘內得到高品質RNA,提取流程方便快捷 產物RNA不含苯酚 RNA在敏感的下游應用中表現出色,如real-time RT-PC
公司簡介
北京冬璞泰和科技有限責任公司 (Beijing Dongputaihe Technology Co.,LTD) 是一家專注于生命科學研究領域的高科技企業 。公司以“聚焦生命科學,發展科研技術”為中心理念,為廣大科學工作者提供包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、蛋白組學、臨床診斷等領域的試劑、耗材、抗體、儀器等相關產品,其服務行業涵蓋生命科學基礎研究、臨床疾病診斷與控制、生物制品的開發與應用、制藥、商品檢驗檢疫、人口與健康、食品安全以及農林牧漁等諸多領域,面向客戶群體有各大醫學院、醫科大學、生命科學院、農林業大學、研究所、醫院、衛生防疫部門、檢驗檢疫部門、公安系統、制藥公司、生物技術公司等單位。
冬璞泰和 與國內外各大生物領域保持密切合作關系,憑借深厚的行業人脈和豐富的專業經驗為廣大科研用戶提供更強大的技術支持和產品動態。
冬璞泰和 注重用心與客戶溝通,定期學習先進技術,積極建立完善及系統的市場網絡,使公司能穩健地持續發展;力求用專業化,簡單化,快速化的服務,幫助人們享受健康的生活。
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產品說明

從細胞/組織樣本中純化不含苯酚的總RNA,配有基因組DNA去除柱
- 獨特的gDNA Eliminator柱,無需DNase處理
- 數分鐘內得到高品質RNA,提取流程方便快捷
- 產物RNA不含苯酚
- RNA在敏感的下游應用中表現出色,如real-time RT-PCR和RNA-Seq
RNeasy Plus Kits將快速方便的RNA純化步驟和有效去除基因組DNA污染整合在一起。使用該試劑盒能夠從多種培養細胞和易裂解組織中純化獲得高純度、高產量RNA。RNeasy Plus Mini Kit 一次能夠純化獲得100 µg總RNA(〉200 nt),并且去除基因組DNA。RNeasy Plus Micro Kit則適用于樣本量較少的情況,可分離獲得45 µg總RNA。該試劑盒可在QIAcube全自動核酸純化儀上實現自動操作,可用RNA
later RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的穩定組織樣本。
性能
使用RNeasy Plus技術從細胞和組織中提取RNA,產物不含基因組DNA,產量高、可重復性好,適用于敏感的下游應用(參見Effective cell genomic DNA removal, Effective tissue genomic DNA removal, High, reproducible RNA yields和Array-ready RNA)。從組織和培養細胞中提取的RNA完整性Agilent RIN數值接近10。
該試劑盒純化產物不含短于200個核苷酸的RNA(如rRNA和tRNA),因此有富集mRNA的效果。如需從培養細胞中分離獲得含有小RNA(如miRNA)的總RNA,我們提供專門的分離方案作為補充,請參見產品使用手冊。
原理
細胞和易裂解組織先在含有異硫氰酸胍的高變性Buffer RLT Plus中裂解和勻質化,能使RNases立即失活,以保證分離到完整的RNA。裂解液再流過gDNA Eliminator柱。該離心柱與高鹽緩沖液共同作用,可選擇性的去除基因組DNA。加入乙醇以提供RNA結合的合適條件,樣本再加入到RNeasy離心柱。含有硅膠膜的特制離心柱能特異性的結合裂解細胞中的RNA。
對于多脂和難裂解組織,推薦使用RNeasy Plus Universal Kits。對于高通量的總RNA純化,推薦使用RNeasy Plus 96 Kit。如需從其他類型樣本中分離含有miRNA的總RNA,推薦使用miRNeasy Kits。
操作流程
RNeasy Plus Micro Kit能從多達5 x 105個細胞或5 mg組織中分離總RNA,RNeasy Plus Mini Kit能夠從107個細胞或30 mg組織中分離總RNA。簡潔的工作流程可在25分鐘內純化得到已去除基因組DNA的RNA。樣本先被裂解和勻質化。裂解液流過gDNA Eliminator柱,在流過gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,樣本再上樣到RNeasy離心柱。RNA結合到膜上,污染物被洗去。獲得高品質RNA,RNeasy Plus Micro Kit的洗脫體積為14 µl,RNeasy Plus Mini Kit的洗脫體積為30 µl。
處理不同的起始樣本可用不同的實驗方案。實驗方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類似。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)進行組織破碎和勻質化時,可能會產生過多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(單獨提供)可充分減少泡沫產生。Reagent DX經仔細檢測,表明配合此試劑盒使用不會影響RNA的純度或下游應用。
應用
RNeasy Plus Kit純化得到的RNA適合對少量DNA污染敏感的下游應用,如定量real-time RT-PCR和RNA-Seq。純化得到的RNA還可用于其他應用。
RNeasy Plus Micro Kit適用于小樣本,包括:
- 激光顯微切割冰凍切片
- 細針穿刺
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